7. 每孔加入底物工作液100ul，大鼠0pg/ml为横坐标，试使用说明书500、剂盒血浆至少作1：2稀释（取50ul，大鼠
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试使用说明书在坐标纸上作图，剂盒2. 以标准品2000、大鼠形成免疫复合物连接在板上，试使用说明书
2. 标准品液配制：使用前加入1ml蒸馏水混匀，剂盒
3. 重复性：板内、大鼠可通过绘制标准曲线求出标本中GRO浓度。试使用说明书第一管加标本稀释液900ul，剂盒
注意事项
1. 以上标准孔及待测样品均建议做复孔，
5. 每孔加酶标抗体工作液100ul。血浆（EDTA、从第七管中吸出500ul弃去。在第一管中加入20ng/ml的标准品溶液100ul混匀后用加样器吸出500ul，板见变异系数均小于12％。置37℃暗处反应15分钟。加标本稀释液50ul,稀释2倍）。
大鼠GRO(GRO)ELISA试剂盒使用说明书
2011-07-25 11:55 · Truda本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。
4. 洗板：同前。62. 5、
3. 每孔中加入第一抗体工作液100ul。31. 2、将反应板充分混匀后置37℃60分钟。
2. 洗涤过程很关键。
4. 本试剂盒宜置4oC冰箱保存。移至第二管。将反应板充分混匀后置37℃120分钟。用抗大鼠GRO/CINC-1/KC(CXCL1)单抗包被于酶标板上，
8. 每孔加入100ul终止液混匀。保持板条干燥。
3. 板条开封后剩余板条要再封好，
试剂盒性能
1. 灵敏度：最小的GRO检测浓度小于16pg/ml。再乘上稀释倍数。肝素抗凝）、
试剂盒组成（2-8℃保存）
酶标板（Coated Wells） | 96孔 | 酶标抗体工作液（Enzyme Conjugate） | 12ml |
10×标本稀释液（Sample Buffer） | 12ml | 20×浓缩洗涤液（Wash Buffer） | 50ml |
标准品（Standards）：20ng/瓶 | 2瓶 | 底物工作液（TMB Solution） | 12ml |
第一抗体工作液（Biotinylated Antibody） | 12ml | 终止液（Stop Solution） | 12ml |
准备试剂与收集血样
1. 收集标本：血清、1000、标准品和样品中的GRO与单抗结合，组织匀浆等尽早检测，
2. 特异性：可同时检测重组或天然的大鼠GRO。细胞培养上清液、细胞上清至少10倍稀释。加入生物素化的抗大鼠GRO，
3. 根据样品OD值在该曲线图上查出相应GRO含量，如此反复作对倍稀释，加入底物工作液显蓝色，2-8℃保存48小时；更长时间须冷冻（-20℃或-70℃）保存，画出标准曲线。最后加终止液硫酸，第八管为空白对照。细胞培养上清液和其它生物体液内)
原理
本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。第二至第八管加入标本稀释液500ul。每次测定应同时做标准曲线。GRO浓度与OD值成正比，洗涤不充分将导致精确度误差及OD值错误地升高。将反应板置37℃30分钟。
5. 本试剂盒仅用于科研，OD值为纵坐标，血浆、125、
9. 30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。血清、
结果计算与判断
1. 所有OD值都应减除空白值后再行计算。在450nm处测OD值，
(用于血清、不能用于临床诊断！配成20ng/ml的溶液。
4. 洗涤液：用重蒸水1:20稀释（示例：1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水）
检测程序
1. 加样：每孔各加入标准品或待测样品100ul，
2. 洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次，不与大鼠其它细胞因子有交叉反应。柠檬酸盐、
6. 洗板：同前。向滤纸上印干。避免反复冻融。
3. 10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释（示例：1ml浓稀释液+9ml蒸馏水）。
