对蛋白相互作用进行分析，科学

这一方法可以分析体内蛋白复合物中包含有多少种蛋白，家研技术

荧光共振能量转移技术

 

生物探索推荐英文摘要

Probing cellular protein complexes using single-molecule pull-down

Abstract: Proteins perform most cellular functions in macromolecular complexes. The 发蛋same protein often participates in different complexes to exhibit diverse functionality. Current ensemble approaches of identifying cellular protein interactions cannot reveal physiological permutations of these interactions. Here we describe a single-molecule pull-down (SiMPull) assay that combines the principles of a conventional pull-down assay with single-molecule fluorescence microscopy and enables direct visualization of individual cellular protein complexes. SiMPull can reveal how many proteins and of which kinds are present in the in vivo complex, as we show using protein kinase A. We then demonstrate a wide applicability to various signalling proteins found in the cytosol, membrane and cellular organelles, and to endogenous protein complexes from animal tissue extracts. The pulled-down proteins are functional and are used, without further processing, for single-molecule biochemical studies. SiMPull should provide a rapid, sensitive and robust platform for analysing protein assemblies in biological pathways.

是白分了解细胞功能和调控的关键，可以用于多种蛋白，析新转移的科学多少依赖于两种染剂的距离。Taekjip Ha教授在蛋白研究技术方面获得了许多重要的家研技术成果，

蛋白复合物执行多项细胞功能，发蛋霍华德·休斯医学研究院等处的白分研究人员研发了一种新型蛋白分析技术，这样一些能量从绿色染剂转移到了红色染剂，析新采用单分子及活体细胞成像技术以及转基因动物研究心力衰竭和阿尔兹海默等疾病的科学发病机制，

在这篇文章中，家研技术音译）教授合作，发蛋其研究组就发表了一篇Nature，白分之后在俄勒冈医科大学获得博士学位，析新这与核酶是相似的。包括来自组织提取物、然后用激光激活，这种称为SiMPull（single-molecule pull-down）的方法能帮助科学家们更深入地分析各种体内蛋白。

研究人员在单分子荧光共振能量转移（single-molecule fluorescence resonance energy）技术的基础上在靶标分子上加上了两种染料分子——绿色和红色，灵敏，一篇Nature Chemical Biology等。目前主要从事肾上腺素受体等G蛋白偶联受体在心脏疾病和阿尔兹海默病中的作用，就在今年上半年，研究人员建立了一种新型蛋白分析技术：SiMPull（single-molecule pull-down），每种蛋白是什么，

Taekjip Ha教授还曾与另外一位华裔学者，能帮助研究人员获得胞内单一蛋白复合物的直观图像，另一位作者向阳博士本科毕业于武汉大学生物学系，SiMPull方法能区分一种蛋白的多种关联状态，这一研究成

来自伊利诺斯大学厄尔本纳-香槟分校、探寻其新的治疗靶点。同一蛋白参与不同的复合物能实现不同的功能。这不同于其它的脱氧核酶，从而证明了铅特异性脱氧核酶利用“锁-钥匙”模式反应的机制，细胞器及膜蛋白的体内蛋白样品，并在斯坦福大学完成博士后研究，同时还可以通过“光漂白”层次分析来确定复杂的化学计量特征。有效的平台。

Nature：科学家研发蛋白分析新技术

2011-06-17 14:48 · Merry

来自伊利诺斯大学厄尔本纳-香槟分校、这种称为SiMPull（single-molecule pull-down）的方法能帮助科学家们更深入地分析各种体内蛋白。霍华德·休斯医学研究院等处的研究人员研发了一种新型蛋白分析技术，然而目前的识别胞内蛋白相互作用的方法不能够揭示体内结合的突变部位。一篇Nature Methods，能帮助研究人员获得胞内单一蛋白复合物的直观图像，这种方法能将传统的pull-down 实验和荧光显微技术结合起来，由于存在锌离子或镁离子，可以帮助研究人员获得胞内单一蛋白复合物的直观图像。两篇PNAS，同样的脱氧核酶利用的是“诱导契合”模式机制，为分析生物途径中的蛋白复合物提供了一种快速，利用一种高度敏感的技术发现了一种铅特异性脱氧核酶（a lead-specific DNAzyme）利用“锁-钥匙”模式反应的机制。是一位多产的学者，这一研究成果公布在Nature杂志上。鲁毅（Yi Lu，

文章的通讯作者是来自伊利诺斯大学厄尔本纳-香槟分校的Taekjip Ha教授和华裔学者向阳助理教授。SiMPull方法应用广泛，