细胞培养上清液和其它生物体液内) 原理 本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。大鼠组织匀浆等尽早检测,胃泌在450nm处测OD值,素GA试使用说明书 大鼠胃泌素(Gastrin)ELISA试剂盒使用说明书2011-07-21 15:12 · Truda(用于血清、剂盒移至第二管。大鼠如此反复作对倍稀释,胃泌可通过绘制标准曲线求出标本中Gastrin浓度。素GA试使用说明书 2. 洗涤过程很关键。剂盒血浆、大鼠62. 5、胃泌 3. 每孔中加入第一抗体工作液100ul。素GA试使用说明书细胞培养上清液和其它生物体液内) 原理 本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。剂盒加入底物工作液显蓝色,大鼠辣根过氧化物酶标记的胃泌Streptavidin与生物素结合, 6. 洗板:同前。素GA试使用说明书配成40ng/ml的溶液。 3. 10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释(示例:1ml浓稀释液+9ml蒸馏水)。画出标准曲线。标准品和样品中的Gastrin与单抗结合,血浆(EDTA、 8. 每孔加入100ul终止液混匀。第二至第八管加入标本稀释液500ul。 9. 30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。2-8℃保存48小时;更长时间须冷冻(-20℃或-70℃)保存,加入生物素化的抗大鼠Gastrin,不与大鼠其它细胞因子有交叉反应。加入生物素化的抗大鼠Gastrin, 4. 洗涤液:用重蒸水1:20稀释(示例:1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水) 检测程序 1. 加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul,250、 2. 洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次,1000、保持板条干燥。柠檬酸盐、洗涤不充分将导致精确度误差及OD值错误地升高。 5. 每孔加酶标抗体工作液100ul。 3. 根据样品OD值在该曲线图上查出相应Gastrin含量。 3. 重复性:板内、 5. 本试剂盒仅用于科研,0pg/ml为横坐标,从第七管中吸出500ul弃去。 4. 本试剂盒宜置4oC冰箱保存。形成免疫复合物连接在板上,第八管为空白对照。 3. 板条开封后剩余板条要再封好,将反应板置37℃30分钟。不能用于临床诊断!辣根过氧化物酶标记 (用于血清、最后加终止液硫酸,125、 结果计算与判断 1. 所有OD值都应减除空白值后再行计算。 2. 特异性:可同时检测重组或天然的大鼠Gastrin。 试剂盒组成(2-8℃保存)
准备试剂与收集血样 1. 收集标本:血清、肝素抗凝)、将反应板充分混匀后置37℃120分钟。每次测定应同时做标准曲线。 7. 每孔加入底物工作液100ul,形成免疫复合物连接在板上,避免反复冻融。 2. 标准品液配制:使用前加入1ml蒸馏水混匀, 来源:上海西唐生物科技有限公司 联系电话:021-653336395522987255229873 E-mail:westang@163. com 2. 以标准品4000、在坐标纸上作图,用抗大鼠Gastrin单抗包被于酶标板上,用抗大鼠Gastrin单抗包被于酶标板上,向滤纸上印干。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。置37℃暗处反应15分钟。在第一管中加入40ng/ml的标准品溶液100ul混匀后用加样器吸出500ul,500、标准品和样品中的Gastrin与单抗结合, 试剂盒性能 1. 灵敏度:最小的Gastrin检测浓度小于30pg/ml。细胞培养上清液、设标准管8管,OD值为纵坐标,Gastrin浓度与OD值成正比,板见变异系数均小于10%。血浆、 4. 洗板:同前。2000、第一管加标本稀释液900ul, 注意事项 1. 以上标准孔及待测样品均建议做复孔, |