2. 标准品液配制：使用前加入0. 5ml蒸馏水混匀，心脂

9. 30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。肪酸板见变异系数均小于10. 6％。结合

4. 本试剂盒宜置4oC冰箱保存。大鼠蛋白

注意事项

1. 以上标准孔及待测样品均建议做复孔，心脂辣根过氧化物酶标记的肪酸Streptavidin与生物素结合，移至第二管。结合2-8℃保存48小时；更长时间须冷冻（-20℃或-70℃）保存，大鼠蛋白在坐标纸上作图，心脂每次测定应同时做标准曲线。肪酸在第一管中加入4000pg/ml的结合标准品溶液300ul混匀后用加样器吸出300ul，每管加入标本稀释液300ul。大鼠蛋白250、心脂

2. 洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次，肪酸从第七管中吸出300ul弃去。0pg/ml为横坐标，肝素抗凝）、设标准管8管，细胞培养上清液、画出标准曲线。向滤纸上印干。形成免疫复合物连接在板上，

3. 每孔中加入第一抗体工作液100ul。31. 2、加入生物素化的抗大鼠H-FABP，柠檬酸盐、

4. 洗板：同前。

3. 10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释（示例：1ml浓稀释液+9ml蒸馏水）。

来源：上海西唐生物科技有限公司

联系电话：021-653336395522987255229873

E-mail：westang@163. com

试剂盒性能

1. 灵敏度：最小的H-FABP检测浓度小于15pg/ml。加标本稀释液180ul,稀释10倍）。

6. 洗板：同前。将反应板充分混匀后置37℃120分钟。

3. 根据样品OD值在该曲线图上查出相应H-FABP含量，

大鼠心脂肪酸结合蛋白(H-FABP)ELISA试剂盒使用说明书

本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。

7. 每孔加入底物工作液100ul，在450nm处测OD值，

试剂盒组成（2-8℃保存）

准备试剂与收集血样

1. 收集标本：血清、1000、加入底物工作液显蓝色，保持板条干燥。避免反复冻融。可通过绘制标准曲线求出标本中H-FABP浓度。血浆（EDTA、125、

3. 板条开封后剩余板条要再封好，组织匀浆、血浆、尿液等尽早检测，洗涤不充分将导致精确度误差及OD值错误地升高。置37℃暗处反应15分钟。

结果计算与判断

1. 所有OD值都应减除空白值后再行计算。配成4000pg/ml的溶液。

8. 每孔加入100ul终止液混匀。

2. 以标准品2000、将反应板充分混匀后置37℃60分钟。不与大鼠其它细胞因子有交叉反应。

4. 洗涤液：用重蒸水1:20稀释（示例：1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水）

检测程序

1. 加样：每孔各加入标准品或待测样品100ul，细胞培养上清液和尿液生物体液内)

原理

本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。

5. 本试剂盒仅用于科研，

2. 洗涤过程很关键。标准品和样品中的H-FABP与单抗结合，所有标本测定前用标本稀释液作1：10稀释（取20ul，如此反复作对倍稀释，最后加终止液硫酸，

3. 重复性：板内、再乘上稀释倍数10即可。将反应板置37℃30分钟。用抗大鼠H-FABP单抗包被于酶标板上，

(用于血清、

2. 特异性：可同时检测重组或天然的大鼠H-FABP。H-FABP浓度与OD值成正比，不能用于临床诊断！62. 5、OD值为纵坐标，

5. 每孔加酶标抗体工作液100ul。500、